
有几百万种特征序列DNA标签链的微珠群,DNA单链分成3段,R1与测序文库的引物序列相一致,CS与扩增子尾端序列相一致,BC是barcode序列,用于标注微珠的身份信息。
- 单个的细胞和蛋白酶先形成混合液。
- 通过微流控的管路,形成油包水的乳浊液。
- 油包水乳浊液有许多单个细胞和蛋白酶混合液的水相的小液滴,这些水相小液滴被油相隔开。每一个水项小液滴相当于一个独立的反应试管。
- 蛋白酶会消化掉各种蛋白,包括缠绕在DNA上的组蛋白。这样就可以把DNA从染色质中释放出来。
- 高温加热,使蛋白酶灭活。
- 第二次微流控操作:把第一步产生的乳浊液,与带有DNA标签链的微珠、扩增引物组、PCR酶和底物等的溶液做第二次的乳浊液化。
- 每个微珠都在一个水相小液滴中。所以这个微珠上的barcode链只会给当前小液滴中的DNA片段加上barcode序列。
- 经过PCR反应,然后测序。
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