非PCR方法实现扩增

PCR不同的扩增子的效率不同,扩增子即便在前面几个循环只有很少的差异,随着循环的增多,差异会呈指数级增加。

EpiCentre公司开发了一种叫做TargetAmp方法,该方法并不使用PCR实现序列的扩增。

它在Ploy(T)尾巴上连上一个启动子——T7-Oligo (dT) Primer,我们简称T7。Ploy(T)与Ploy(A)结合,经过逆转录获得第一条cDNA链。

然后将RNA链洗脱掉,只保留cDNA的单链。随后,利用聚合酶,得到双链cDNA。注意,此时的两条cDNA链都有T7

RNA聚合酶可以识别T7实现转录,这样就可以利用转录来实现体外的mRNA的扩增。

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